P6782

Sigma-Aldrich

过氧化物酶 来源于辣根

Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)

别名:

供体：过氧化氢氧化还原酶, 辣根过氧化物酶

CAS号:

9003-99-0

EC 号:

1.11.1.7 (BRENDA, IUBMB)

EC 号:

232-668-6

MDL编号:

MFCD00071339

eCl@ss:

32160410

NACRES:

NA.54

属性

类型

Type VI-A

质量水平

300

形式

essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

950-2000 units/mg solid (using ABTS)

分子量

~44 kDa

溶解性

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)

H2O: soluble

application(s)

diagnostic assay manufacturing

储存温度

2-8°C

InChI

1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H

InChI key

JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

说明

一般描述

辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca2+ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

应用

Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器，以便检测半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）的培养基（MRS琼脂板）的组分，用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H2O2 催化分解为O2，并且TMB在O2存在下将菌落染成蓝色。因此，在含5% CO2 的空气环境下孵育48小时后，MRS琼脂上产生H2O2 的菌落呈深蓝色。不产生H2O2 的菌落仍为无色。它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。它还被用于测定溶液中的葡萄糖和过氧化物。

辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中（Amoracia rusticana）。 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。 产品P6782是VI-A型，本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯，并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积。

生化/生理作用

HRP容易与过氧化氢（H2O2）结合，生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标记物。同时，其糖基化会产生较低的非特异性结合。已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+和Pb2+离子可抑制该酶活性。

辣根过氧化物酶与底物一起孵育时，产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物，以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。

包装

包装单位为mg固体

联系

与P8375相似

单位定义

一个ABTS单元将在25°C、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

制备说明

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液（pH 6.0）中，可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。

分析说明

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。

本品使用ABTS测定，以便与其他供应商的单位进行比较：每mg固体约1,000单位